【含量测定】 照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。
色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,以水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为(1~40min 274nm,40.01~70min 254nm )。
时间(分钟) | 流动相 A(%) | 流动相 B(%) |
0 | 5 | 95 |
10 | 20 | 80 |
18 | 35 | 65 |
48 | 55 | 45 |
59 | 85 | 15 |
60~70 | 5 | 95 |
对照品溶液的制备分别精密称取龙胆苦苷、丹皮酚、甘草苷、欧前胡素、异欧前胡素五个对照品,加甲醇制成每1ml含70μg、50μg、5μg、5μg、2μg的混合对照品溶液,作为对照品溶液。
供试品溶液的制备 取本品装量差异下的内容物,研细,取1g,精密称定,精密加入80%甲醇25ml,超声提取30分钟(频率:53K HZ,功率:100W),取出,放冷至室温,再称定重量。用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,作为供试品溶液。
测定法分别精密吸取混合对照品溶液与供试品溶液 10µl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每粒含秦艽以龙胆苦苷(C16H20O9)计,不得少于0.40mg;含甘草以甘草苷(C21H22O9)计,不得少于10µg;含徐长卿以丹皮酚(C9H10O3)计,不得少于0.15mg;含白芷以欧前胡素(C15H1404)计,不得少于30µg,以异欧前胡素(C15H1404)计,不得少于10µg。