注射用三磷酸胞苷二钠检验方法(2):注射用三磷酸胞苷二钠含量测定检验方法

发布时间:2018-01-30

(1)含量均匀度照含量测定项下的方法测定,应符合规定(中国药典2015年版通则0941)。

(2)含量测定照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.1mol/L磷酸盐缓冲液(取磷酸氢二钠17.8g,磷酸二氢钾6.8g,加水900ml溶解,用1mol/L氢氧化钠溶液调节pH值至7.0,加入四丁基溴化铵0.80g,加水至1000ml,摇匀)为流动相,检测波长为271nm。取供试品溶液2ml,水浴加热1小时,作为系统适用性溶液,精密量取20μl,注入液相色谱仪,出峰次序依次为一磷酸胞苷、二磷酸胞苷、三磷酸胞苷。理论板数按三磷酸胞苷峰计算不低于3000,三磷酸胞苷峰与二磷酸胞苷峰及与其峰后相邻色谱峰之间的分离度均应大于2.0。精密量取胞苷对照品溶液20μl,注入液相色谱仪,记录色谱图,理论板数按胞苷峰计算不低于3000。

测定法取本品1瓶,按标示量分别加流动相溶解并定量稀释制成每1ml中约含0.4mg的溶液,作为供试品溶液,精密量取20μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取胞苷对照品适量,精密称定,用流动相定量稀释制成每1ml中约含0.18mg的溶液,同法测定。下式计算三磷酸胞苷二钠含量。


式中CC为胞苷对照品溶液的浓度(mg/ml);

TCTP为三磷酸胞苷二钠的峰面积

2.167为三磷酸胞苷二钠与胞苷分子量的比值;

TC为胞苷峰面积