有关物质取本品内容物，混匀，研细，精密称取适量，加无水乙腈（饱和无水硫酸钠乙腈溶液）定量稀释制成每1ml中约含西罗莫司0.5mg的溶液，滤过，取续滤液作为供试品溶液；另取西罗莫司对照品适量，精密称定，加无水乙腈溶解并定量稀释制成每1ml中约含5μg的溶液，作为对照品溶液。照高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定，用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以20mmol/L甲酸铵溶液（用甲酸调节pH值至3.8）为流动相A，乙腈（含1%的叔丁基甲醚）为流动相B，按下表进行线性梯度洗脱；流速为每分钟1.5ml；检测波长为277nm；柱温为35℃。取西罗莫司对照品约5mg，置5ml量瓶中，加2ml无水乙腈使溶解，加0.1mmol/L氢氧化钠溶液1ml，振摇，使混合均匀，加0.1mmol/L盐酸溶液1ml，用无水乙腈稀释至刻度，摇匀，作为系统适用性溶液。精密量取20μl，注入液相色谱仪，记录色谱图，西罗莫司主峰的保留时间应在23～25分钟之间。主峰相对保留时间约为0.56、0.7、0.8和0.87的色谱峰分别为断雷帕霉素、脯氨酰西罗莫司、西罗莫司异构体A和10-O-去甲基西罗莫司，10-O-去甲基西罗莫司峰与西罗莫司峰之间的分离度应符合要求。取西罗莫司对照品适量，精密称定，用无水乙腈溶解并稀释制成每1ml中约含20mg的溶液，每ml中加入5mmol偶氮二异丁腈（AIBN），充入氧气，密封，50℃加热30分钟。精密量取5μl进样分析。主峰相对保留时间约为1.4~1.5处如有明显的杂质峰，即为西罗莫司氧化二聚物。精密量取供试品溶液和对照品溶液各20μl，分别注入液相色谱仪，记录色谱图。供试品溶液色谱图中如有杂质峰，以西罗莫司计，按外标法以峰面积计算，断雷帕霉素不得过西罗莫司标示量的1.0%，西罗莫司异构体A不得过西罗莫司标示量的1.0%，西罗莫司氧化二聚物不得过西罗莫司标示量的0.1%，其他单个未知杂质不得过西罗莫司标示量的1.0%，总杂质不得过西罗莫司标示量的2.0%。