称取供试品粉末1.5g至50ml量瓶中，加1%碳酸氢铵溶液40ml，超声处理30min，加1%碳酸氢铵稀释至刻度，摇匀，过0.22μm膜，精取续滤液1ml至1.5ml塑料离心管中，加酶溶液0.4ml（采用sigmaT1426-50MG胰蛋白酶，加1%碳酸氢铵制成每1mg/ml的溶液），摇匀，37℃恒温酶解12小时，作为供试品溶液。
另取鹿角胶对照品0.1g，同法制成对照药材溶液。照高效液相色谱-质谱法试验，以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.1%甲酸溶液为流动相A，以乙腈为流动相B，流速0.3ml/min，按下表进行梯度洗脱，采用质谱检测器，电喷雾正离子模式（ES+）,进行多反应监测（MRM），选择质荷比（m/z）765.4(双电荷)→554.0和m/z765.4(双电荷)→733.0作为检测离子对。取鹿角胶对照药材溶液，进样5μl，按上述检测离子对测定的MRM色谱峰的信噪比应大于3:1。
时间（分钟） | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 95 | 5 |
2 | 95 | 5 |
4 | 70 | 30 |
5 | 70 | 30 |
6 | 95 | 5 |
8 | 95 | 5 |
吸取供试品溶液5μl,注入高效液相色谱-质谱联用仪，测定。在质荷比（m/z）765.4(双电荷)→554.0和m/z765.4(双电荷)→733.0离子对提取党的供试品离子流色谱中，应同时呈现与对照药材色谱保留时间一致的色谱峰。
