色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;乙腈为流动相A,0.1%磷酸溶液为流动相B,梯度洗脱程序见下表;检测波长为260nm、224nm;柱温35℃;流速1.0ml/min。理论板数按淫羊藿苷峰计算不低于20000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~35 | 10→32 | 90→68 |
35~45 | 32→60 | 68→40 |
对照品溶液的制备精密称取原儿茶酸对照品、金丝桃苷对照品、特女贞苷对照品、淫羊藿苷对照品适量,加甲醇分别制成每1ml含原儿茶酸12μg,金丝桃苷30μg,特女贞苷、淫羊藿苷各80μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品20片,除去包衣,精密称定,研细,取约1.0g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入80%甲醇25ml,密塞,称定重量,加热回流40分钟,放冷,再称定重量,用80%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每片含狗脊、金樱子以原儿茶酸(C7H6O4)计,不得少于0.03mg;含菟丝子以金丝桃苷(C21H20O12)计,不得少于0.08mg;含女贞子以特女贞苷(C31H42O17)计,不得少于0.27mg;含淫羊藿以淫羊藿苷(C33H40O15)计,不得少于0.32mg。