色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以四丁基氢氧化铵磷酸盐缓冲液(取40%四丁基氢氧化铵水溶液4ml,加水195ml,用磷酸调节pH值至3.0,加水至800ml)-乙腈(80:20)为流动相A,乙腈为流动相B;检测波长为240nm,理论板数按依地酸螯合物峰计算应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0 | 90 | 10 |
26 | 90 | 10 |
27 | 15 | 85 |
35 | 15 | 85 |
36 | 90 | 10 |
45 | 90 | 10 |
对照品溶液的制备精密称取依地酸二钠对照品适量,加水溶解并稀释成每1ml含1mg的溶液,分别精密量取适量置量瓶中,用0.02%硫酸铜溶液稀释成2μg/ml、10μg/ml、30μg/ml、50μg/ml、70μg/ml、100μg/ml、150μg/ml的标准系列溶液。
供试品溶液的制备取本品,摇匀,精密量取2.5ml,置25ml量瓶,用0.02%硫酸铜溶液稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。
测定法分别取不同浓度的对照品溶液进样20μl,记录色谱峰面积,以对照品浓度为横坐标,以峰面积值为纵坐标绘制标准曲线,取供试品溶液进样20μl,记录色谱图,按外标法以峰面积计算,即得(若处方中加入的依地酸盐非依地酸二钠,则按分子量折算)。