色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为203nm。理论板数按人参皂苷Rg1峰计应不低于6000(人参皂苷Rg1、三七皂苷R1峰的分离度应大于1.5)。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~50 | 19 | 81 |
50~60 | 19→29.5 | 81→70.5 |
60~85 | 29.5 | 70.5 |
85~105 | 29.5→40 | 70.5→60 |
105~106 | 40→70 | 60→30 |
106~115 | 70 | 30 |
对照品溶液的制备取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1对照品适量,加甲醇制成每1ml各含0.25mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品20片,除去包衣,研细,取2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,加乙醚50ml,浸泡1小时,超声处理5分钟(功率700W,频率40kHz),取出,滤过,滤渣挥干后连同滤纸置具塞锥形瓶中,精密加入水饱和正丁醇50ml,密塞,称定重量,超声处理20分钟(功率700W,频率40kHz),取出,放冷,再称定重量,用水饱和正丁醇补足减失的重量,摇匀,滤过,精密吸取续滤液25ml,置分液漏斗中,用氨试液洗涤2次,每次15ml,弃去氨液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇溶解至10ml量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10µl,注入液相色谱仪,测定,即得。
本品每片含人参皂苷Rg1(C42H72O14)不得少于0.35mg;含人参皂苷Rb1(C54H92O23)不得少于0.25mg;含人参皂苷Rg1(C42H72O14)和人参皂苷Rb1(C54H92O23)总量不得少于0.65mg。