磷酸苯丙哌胶囊(2):磷酸苯丙哌林胶囊有关物质项目检验方法

发布时间:2018-01-30

取本品内容物适量,加甲醇-水(1:1)制成每1m1中约含磷酸苯丙哌林2mg的溶液,超声使溶解,过滤,取续滤液作为供试品溶液;精密量取适量,用甲醇-水(1:1)稀释成每1m1中含磷酸苯丙哌林20μg的溶液,摇匀,作为对照溶液。照高效液相色谱法(《中国药典》四部通则0512)测定,用十八烷基键合硅胶为填充剂(Thermo Acclaim120 C18 4.6*250mm,5μm; Waters Symmetry C18 *150mm,4.6*250mm,5μm或效能相当的色谱柱);以醋酸盐缓冲液(取醋酸铵7.7g,加水800ml溶解,用冰醋酸调pH值至3.3,用水稀释至1000ml)为流动相A,以甲醇为流动相B,按下表梯度洗脱条件进行梯度洗脱,调节流速或流动相比例使主峰出峰时间约为22min,检测波长270nm。取对照溶液20μl注入液相色谱仪,调节检测器灵敏度,使主峰峰高约为满量程的20%;再精密量取供试品溶液和对照溶液各20μl分别注入液相色谱仪,记录色谱图至主成分峰保留时间的2倍。除去辅料峰外,供试品溶液中如有杂质峰,与对照溶液比较,单个杂质峰面积不得大于对照溶液主峰面积的0.5倍(0.5%),各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积(1.0%)。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0

50

50

15

50

50

40

20

80

50

20

80