宫炎康颗粒检验方法(2):宫炎康颗粒品种柴胡鉴别项目检验方法

发布时间:2018-01-30

【鉴别】(1)取本品15g,研细,加水50ml使溶解,用水饱和的正丁醇振摇提取3次,每次15ml,合并正丁醇液,用氨试液30ml洗涤1次,再用正丁醇饱和的水洗涤2次,每次20ml,弃去水液,正丁醇液蒸干,残渣加甲醇1ml使溶解,作为供试品溶液。另取柴胡皂苷b2对照品,加甲醇制成每1ml含0.5mg的溶液,作为对照品溶液。照薄层色谱法(2015年版中国药典四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μl,分别点于同一高效硅胶G薄层板上,以乙酸乙酯-乙醇-水(8:2:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以2%对二甲氨基苯甲醛的40%硫酸溶液,在60℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照品色谱相应位置上,显相同颜色斑点;置紫外光灯(365nm)下检视,显相同颜色的荧光斑点。

【鉴别】(2)照高效液相色谱法(中国药典2015年版通则0512)测定。

色谱条件与系统适应性试验色谱柱:Thermo ODS-2 HYPERSIL(250 × 4.6 mm,5 μm);以乙腈为流动相A,水为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱;检测波长为252nm(光谱范围:200~400nm)柱温:30°C流速:1.0 ml/min。

时间

A(%)

B(%)

0

33

67

20 min

40

60

40 min

53

47

供试品溶液的制备取“薄层色谱法鉴别”项下的供试品溶液,用甲醇稀释5倍,摇匀,作为供试品溶液。

对照品溶液的制备取柴胡皂苷b2对照品适量,精密称定,加甲醇制成每1ml各含0.5mg的溶液,即得。

测定法分别精密吸取供试品溶液、对照品溶液各10μl,注入液相色谱仪,记录色谱图。

结果判断供试品色谱中,在与柴胡皂苷b2对照试剂色谱保留时间相应的位置应出现相同的色谱峰。采用二极管阵列检测器比较相应色谱峰在200~400nm波长范围的紫外-可见吸收光谱,吸收光谱应相同。

备注:当鉴别(1)与鉴别(2)结果不一致时,以鉴别(2)液相色谱法结果为判定依据。