照高效液相色谱法测定
色谱条件十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂 (SHISEIDO CAPCELL MGⅡ C18,250 mm × 4. 6 mm,5 μm)的色谱柱;流动相:0.02mol/L醋酸铵溶液(冰醋酸调pH至4.0)为流动相(A)-甲醇(B)梯度洗脱,洗脱程序见下表;检测波长:255nm(苯甲酸、山梨酸、对羟基苯甲酸酯类)、308nm(脱氢乙酸);流速:1.0 mL·min-1。
时间(min) | 流动相A,% | 流动相B,% |
0 | 80 | 20 |
5 | 55 | 45 |
30 | 55 | 45 |
35 | 80 | 20 |
45 | 80 | 20 |
对照品溶液的制备分别精密称取苯甲酸、山梨酸、脱氢乙酸对照品各12 mg,用 50% 甲醇溶液溶解并稀释至10 mL,摇匀,作为对照品贮备液;精密称取对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯对照品各10 mg,分别用50% 甲醇溶液溶解并稀释至25 mL,摇匀,作为对照品贮备液;精密量取各对照品储备液1 mL置于同一20 mL量瓶中,用50%甲醇稀释至刻度,摇匀,作为混合对照品溶液。
供试品溶液的制备 精密称取样品适量(约相当于1ml),用50%甲醇溶液稀释至25ml,摇匀,作为供试品溶液。(或根据样品具体含量用50%甲醇溶液进行稀释)。
测定法 分别精密吸取各对照品溶液与上述供试品溶液各20µl,注入液相色谱仪,测定,即得。