色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以水为流动相A,以甲醇为流动相B,以四氢呋喃为流动相C,按下表中的规定进行梯度洗脱;柱温为30℃;检测波长为250nm。理论板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
梯度洗脱程序
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) | 流动相C(%) |
0 | 70 | 15 | 15 |
10 | 70 | 15 | 15 |
65 | 20 | 60 | 20 |
70 | 5 | 75 | 20 |
71 | 70 | 15 | 15 |
75 | 70 | 15 | 15 |
对照品溶液的制备取五味子醇甲对照品、五味子酯甲对照品、五味子甲素对照品和五味子乙素对照品适量,精密称定,加甲醇分别制成每l ml 各含0.01 mg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品1 g,研细,精密称定,置100 mL具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20 mL,称定重量,超声处理30 min,取出,放冷,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法精密吸取对照品溶液10µl和供试品溶液20µl,注入液相色谱仪,测定,即得。
样品中若检测出五味子酯甲与五味子醇甲峰面积的比值大于0.043时,可初步判断有南五味子投料。