【含量测定】照高效液相色谱法(通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以10mmol/L醋酸铵溶液为流动相A，以甲醇为流动相B，柱温：40℃；流速0.3ml/min；按下表进行梯度洗脱。

以三重四级杆质谱仪作为检测器，电化学喷雾离子源（ESI），黄曲霉毒素B₁/B₂/G₁/G₂的采集模式及测定参数见下表，色谱图见下图。

表黄曲霉毒素B₁/B₂/G₁/G₂的采集模式及测定参数

图53 黄曲霉毒素B₁/B₂/G₁/G₂对照品总离子流图

对照品溶液的制备精密量取黄曲霉毒素混合对照品溶液（黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2 的标示浓度分别为1. 0µg/ml、0. 3µg/ml、1.0/µg/ml、0.3µg/ml)适量，用70%甲醇稀释为每ml含黄曲霉毒素B₁2 ng、黄曲霉毒素B₂0.7ng、黄曲霉毒素G₁2 ng、黄曲霉毒素G₂1ng的系列对照品溶液。

供试品溶液的制备取样品1.0g（过二号筛），精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入甲醇15ml，密塞，超声30分钟，过滤，取续滤液即得。

测定法精密吸取上述系列对照品溶液各5µ1, 注人高效液相色谱-质谱仪，测定峰面积，以峰面积为纵坐标，进样浓度为横坐标，绘制标准曲线。另精 密吸取上述供试品溶液5µ1，注入髙效液相色谱-串联质谱仪，测定峰面积，从标准曲线上读出供试品中相当于黄曲霉毒素B1、黄曲霉毒素B2、黄曲霉毒素G1、黄曲霉毒素G2的浓度，计算，即得。