照高效液相色谱-质谱法（通则0512和通则0431）测定。
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈为流动相A，0. 1%甲酸溶液为流动相B按下表梯度洗脱；流速0.3mL·min-1，进样量1μL。
时间（分钟） | 流动相A（%） | 流动相B（%） |
0 | 10 | 90 |
30 | 60 | 40 |
质谱条件：电喷雾电离源（ESI），Nebulizing Gas Flow:3L/min，Heating Gas Flow:10L/min，Interface Temperature:300℃，DL Temperature:200℃，Heat Block Temperature:400℃，Drying Gas Flow:8L/min；负离子检测模式；二级质谱（MRM）为多反应监测模式，具体参数设置见下表。
斯皮诺素和毛蕊异黄酮葡萄糖苷质谱参数
| | Sample Name | m/z | Ref. Ions | Q1 Pre Bias(V) | CE | Q3 Pre Bias(V) |
1 | 斯皮诺素[M-H]- | 607.2>292.1 | 607.2>427.05 | 24 | 17 | 19 |
2 | 毛蕊异黄酮葡萄糖苷[M+HCOO]- | 491.2>283.1 | 491.2>268.05 | 24 | 38 | 18 |
对照品溶液的制备分别取毛蕊异黄酮葡萄糖苷对照品与斯皮诺素对照品适量，精密称定，加70%甲醇逐级稀释制成每mL各含毛蕊异黄酮葡萄糖苷与斯皮诺素0.1，0.2，0.3，0.5，1，2μg的系列混合对照品溶液，即得。
供试品溶液的制备精密量取本品5ml，置10ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
测定法精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1µL，注入液相色谱仪，测定，即得。
每1ml含黄芪以毛蕊异黄酮葡萄糖苷（C22H22O10）计，不得少于0.5μg；含酸枣仁以斯皮诺素（C28H32O15）计，不得少于0.4μg。
