感冒退烧片检验方法(3):感冒退烧片中葛根含量测定检验方法

发布时间:2018-01-29

【含量测定】

葛根照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈为流动相A,0.4 %磷酸为流动相B,按下表中规定进行梯度洗脱;流速为1.0 ml/min;检测波长为250 nm;理论塔板数按葛根素峰计算应不低于20000。

时间(分钟)

流动相A(%)

流动相B(%)

0~25

5→15

95→85

25~38

15→25

85→75

38~40

25→30

75→70

40~50

30→15

70→85

50~70

15→70

85→30

70~80

70→5

30→95

80~90

5

95

对照品溶液的制备取葛根素对照品适量,精密称定,加30%乙醇制成每1ml含45μg的溶液,即得。

供试品溶液的制备取本品10片,除去包衣,精密称定,研细,取约0.1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入30%乙醇溶液25ml密塞,称定重量,超声处理10分钟,放冷,再称定重量,用30%乙醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,以葛根素对照品的峰面积为对照,分别按下表相对应的校正因子计算葛根素、3’-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的含量,用待测成分色谱峰与葛根素色谱峰的相对保留时间确定3’-甲氧基葛根素、大豆苷、大豆苷元的峰位,其相对保留时间应在规定值的±5%范围之内(若相对保留时间偏离超过5%,则应以相应的被替代对照品确证为准),即得。相对保留时间及校正因子(F)见下表:

待测成分(峰)

相对保留时间

校正因子(F)

葛根素

1

1

3’-甲氧基葛根素

1.08

1.27

大豆苷

1.25

1.18

大豆苷元

2.03

0.78

本品每片含葛根以葛根素(C21H20O9)、3’-甲氧基葛根素(C22H22O10)、大豆苷(C21H20O9)、大豆苷元(C15H10O4)的总量计,糖衣片不得少于1.70 mg,薄膜衣片不得少于3.40 mg。