色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以0.025mol/L 磷酸二氢钠(用磷酸调pH至3.7)为流动相A,以甲醇为流动相B,进行梯度洗脱;流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长采用双波长扫描228 nm、258 nm。理论板数按羟苯乙酯峰计算应不低于2000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~25 | 71 | 29 |
25~45 | 71→15 | 29→85 |
对照品溶液的制备取苯甲酸钠、羟苯乙酯对照品适量,精密称定,加50%甲醇制成每1ml含苯甲酸钠50µg、羟苯乙酯10µg的溶液,摇匀,即得。
供试品溶液的制备精密量取本品1ml,置25ml量瓶中,用50%甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
结果判断供试品色谱中不应呈现与苯甲酸钠对照品色谱峰保留时间相一致的色谱峰。