【指纹图谱】照高效液相色谱法(通则0512)测定。
色谱条件及系统适用性试验以十八烷基硅胶键合硅胶为填充剂(色谱柱内径:2.1mm);以流动相A:甲醇:乙腈(1:1),流动相B:1%冰醋酸;进行梯度洗脱,流速:0.2ml/min,检测波长:300nm,柱温:30℃,进样量:1μl。理论板数按橙皮苷峰计算应不低于2500。
时间(min) | 流动相A | 流动相B |
0~8 | 25% | 75% |
12 | 35% | 65% |
24 | 70% | 30% |
28 | 75% | 25% |
对照品溶液的制备分别取芸香柚皮苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、异橙黄酮、甜橙黄酮、6-去甲氧基桔皮素、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘红素、去甲氧基川陈皮素对照品各5mg,置25ml容量瓶中,用50%甲醇定容,制成对照品储备液,精密量取各对照品储备液1ml,置25ml容量瓶中,混匀,得混合对照品溶液。
供试品溶液的制备取装量差异下的本品,混匀,取约0.4g(散),或取装量差异项下的本品内容物(胶囊),研细,取约0.4g,或片重差异项下的本品(片),研细,取约0.5g,精密称定,置50ml锥形瓶中,精密量取50%甲醇溶液25ml,超声30min,即得。精密量取蛇胆陈皮液、口服液5ml,置10ml容量瓶中,用50%甲醇定容至刻度,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各1μl,注入液相色谱仪,测定,即得。
结果判断供试品色谱中应呈现与芸香柚皮苷、橙皮苷、异橙黄酮、甜橙黄酮、6-去甲氧基桔皮素、川陈皮素、3,5,6,7,8,3',4'-七甲氧基黄酮、橘红素、去甲氧基川陈皮素对照品色谱峰保留时间相一致的色谱峰,而不应该呈现与柚皮苷及新橙皮苷对照品色谱峰保留时间相一致的色谱峰。