土大黄苷检查方法:
(1)薄层色谱法:
取跌打活血散3g,加甲醇25mL,超声提取(功率300W,频率40kHz)30 min,滤过,滤液作为供试品溶液。另取土大黄苷对照品,加甲醇制成每1mL含0.1mg的溶液。照薄层色谱法(中国药典2015年版四部通则0502)试验,吸取上述两种溶液各5μL,分别点样于聚酰胺薄膜上,以甲苯-甲酸乙酯-丙酮-甲酸-甲醇(30:5:5:0.1:20)为展开剂,展开,取出,晾干,置紫外光灯 (365 nm)下检视。供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,不得显相同颜色的荧光斑点。若出现相同颜色的荧光斑点,则用下列高效液相色谱法验证。
(2)高效液相色谱法:照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则 0512)测定
色谱条件与系统适应性试验:用十八烷基键合硅胶为填充剂;以甲醇-乙腈-水(30:7:63)为流动相;采用二极管阵列检测器检测;检测波长:320 nm。理论板数按土大黄苷峰计算应不低于2500。
对照品溶液的制备:取土大黄苷对照品适量,加甲醇制成每1 ml含80 µg的溶液,即得。
测定法:吸取对照品溶液和上述(1)供试品溶液各10 µl,注入液相色谱仪,记录色谱图。
结果判断:供试品色谱中,应不得检出与对照品保留时间相同的色谱峰。若检出相同的色谱峰,其在200 ~ 400 nm波长范围的吸收光谱不得与对照品相同。