【特征图谱】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部附录0512)测定。
色谱条件与系统适应性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以033mol/L 磷酸二氢钾溶液为流动相B,按下表规定进行梯度洗脱;柱温为35℃;流速为0.8 mL·min-1;检测波长:220nm。理论板数按盐酸小檗碱色谱峰计算,应不低于5000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~12 | 10 | 90 |
30 | 30 | 70 |
45 | 50 | 50 |
55 | 70 | 30 |
75 | 70 | 30 |
参照物溶液的制备取盐酸小檗碱对照品、黄柏内酯对照品、黄柏酮对照品、五味子醇甲对照品、五味子醇乙对照品、五味子乙素对照品适量,精密称定,分别加甲醇制成每1ml含50μg的溶液,即得。
另取盐酸巴马汀对照品、安五酯素对照品适量,精密称定,分别加甲醇制成每1ml含50μg的溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品20片,包衣片除去包衣,研细,取约5片的量,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇20ml,密塞,称定重量,加热回流45分钟,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取参照物溶液和供试品溶液各10μL,注入液相色谱仪, 测定,即得。