色谱条件与系统使用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂,以乙腈为流动相A,以0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中的规定进行梯度洗脱,检测波长为348nm,柱温为25℃,流速为1.0ml/min。理论板数按绿原酸峰计算应不低于3000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0-15 | 10→18 | 90→82 |
15-35 | 18→20 | 82→80 |
35-45 | 20 | 80 |
对照品溶液的制备对照品溶液的制备:分别取芦丁、绿原酸、木樨草苷和3,5-O-双咖啡酰基奎宁酸对照品适量,精密称定,加甲醇稀释溶解制成每1ml中约含10ug、15ug、10ug和10ug的混合溶液,作为混合对照品溶液。
供试品溶液的制备取本品10片,研细,取1g,精密称定,精密加入50%甲醇25ml,称定重量,超声提取30分钟,放冷,再称定重量,用50%甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl,注入液相色谱仪,测定,即得。