注射用辅酶A检验方法(2):注射用辅酶A含量测定方法

发布时间:2017-06-20

含量测定】照高效液相色谱法(中国药典2015年版四部通则0512)测定。

色谱条件与系统适应性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;磷酸盐缓冲液(pH6.5)—甲醇(90:10)为流动相;检测波长为259nm,柱温:25℃。取辅酶A对照品约4mg,加入1mol/L盐酸溶液2ml溶解,于35℃放置3小时,放冷,加入1mol/L氢氧化钠溶液2ml,加入水6ml,混匀,制得辅酶A与杂质Ⅳ的混合溶液,作为系统适应性溶液,取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图,辅酶A峰与其后的杂质Ⅳ峰(相对保留时间约为1.14)间的分离度应符合要求。理论板数按辅酶A峰计算不低于2500。

测定法:取本品10支,分别加水溶解并稀释制成每1ml中含0.12mg的溶液,做为供试品溶液。精密量取10μl注入液相色谱仪,记录色谱图;另取辅酶A对照品,同法测定。按外标法以峰面积计算每支含量,并求出10支的平均含量,即得。