【特征图谱】照高效液相色谱法（通则0512）测定

色谱条件与系统适用性试验Kromasil 5-C100 (250mm×4.6mm×5μm)，以乙腈为流动相A，以0.1%磷酸溶液为流动相B，按下表中的规定进行梯度洗脱；检测波长为220nm，60分钟时变换波长为250nm。流速为1.0mL/min。

对照品溶液的制备取升麻素苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、甘草苷、甘草酸铵、绿原酸、木犀草苷适量，加50%甲醇配制成每1ml含升麻素苷50μg、5-O-甲基维斯阿米醇50μg、甘草酸铵50μg（甘草酸重量=甘草酸铵重量/1.0207）、甘草苷20μg、绿原酸20μg、木犀草苷20μg的溶液。

对照药材溶液的制备分别取甘草对照药材0.2g、苍耳子对照药材1g、菊花对照药材0.4g、板蓝根对照药材0.6g、三叉苦0.4g，精密称定，加水150ml，煎煮约3小时（菊花煎煮1.5小时），滤过，滤液蒸干，精密加50%甲醇20ml使残渣溶解并转移至三角瓶中，超声处理（功率320W，频率40kHz）30分钟，滤过，取续滤液，即得。再取鹅不食草0.1g、鱼腥草0.15g、防风0.3g,分别精密加入50%甲醇20ml, 超声处理30分钟，滤过，即得。

供试品溶液的制备取本品适量，研细，取约1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇20ml，称定重量，超声处理30分钟（功率320W，频率40kHz），放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。

测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。

供试品特征图谱中应有19个特征峰，与升麻素苷峰相应的峰为S峰，计算各特征峰与S峰的相对保留时间，其相对保留时间应在规定值的±5%之内。规定值为：0.280（峰1）、0.352（峰2）、0.375（峰3）、0.405（峰4）、0.573（峰5）、0.645（峰6）、0.682（峰7）、0.939（峰8）、0.969（峰9）、1（S）、1.014（峰11）、1.199（峰12）、1.239（峰13）、1.269（峰14）、1.295（峰15）、1.371（峰16）、1.572（峰17）、1.639（峰18）、2.299（峰19）

高效液相对照图谱