【检查】土大黄苷

（1）取本品适量，研细，称取1g，置具塞锥形瓶中，加乙酸乙酯 20 ml，加热回流30 min，滤过，蒸干，残渣加甲醇5 ml溶解，作为供试品溶液。另取土大黄苷对照品，加甲醇制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（中国药典2015年版四部通则0502）试验，吸取上述两种溶液各5～10µl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以二氯甲烷-甲醇-甲酸-水（10：3.5：0.2：0.3）为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯（365nm）下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上，不应显相同颜色的荧光斑点，若出现相同颜色的荧光斑点，则用下列高效液相色谱法验证。

（2）高效液相色谱法（中国药典2015年版四部通则0512）测定。

色谱条件与系统适应性试验 以十八烷基硅烷键和硅胶为填充剂;以乙腈－水（20：80）为流动相；采用二级管阵列检测器；检测波长为325nm。理论板数按土大黄苷峰计算应不低于3000。

对照品溶液的制备 取土大黄苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml 含40μg的溶液，即得。

供试品溶液的制备取本品适量，研细，称取0.5~2g，置具塞锥形瓶中，精密加甲醇 20 ml，精密称定，超声提取30分钟（功率500W，频率40Hz），放冷，再称定重量，用甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得。

测定法 吸取对照品溶液及供试品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图。

结果判断 供试品色谱中，应不得出现与对照品色谱保留时间相同的色谱峰。若出现保留时间相同的色谱峰，其在280～400nm 波长范围的紫外-可见吸收光谱应与对照品不相同。

备注：必要时可采用高效液相色谱-质谱联用的方法验证。建议采用A为0.2%甲酸乙腈, B为0.2%甲酸溶液流动相系统，梯度洗脱。