妇康宁片检验方法(1):妇康宁片中麦冬皂苷D、山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检验方法

发布时间:2017-06-20

【检查】 麦冬(麦冬皂苷D),山麦冬(山麦冬皂苷B、短葶山麦冬皂苷C)

色谱条件Zorbax Eclipse Pluse C18(100 mm×2.1mm,1.8μm);以乙腈为流动相A,0.1%甲酸为流动相B,等度洗脱,A相50%,B相50%;流速:0.3ml/min;柱温:35 ℃。

质谱条件电喷雾离子源(ESI),载气温度:350℃;载气流速:5L·min-1;喷雾电压: 35 psi;毛细管电压:3600 V;碰撞电压(Fragmentor) 130V;扫描模式为质谱多反应监测(MRM),具体参数设置见下表。

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扫描时间

扫描类型

筛查成分

成分归属

母离子

子离子

CE

监测模式

1

3-5min

MRM

短葶山麦冬皂苷C

短葶山麦冬

915.6[M+HCOO]-

869.6

35eV

Negative

2

5-8min

MRM

麦冬皂苷D

麦冬

899.6[M+HCOO]-

853.6

35eV

Negative

3

5-8min

MRM

山麦冬皂苷B

湖北麦冬

723.4 [M+H]+

269.2

25eV

Positive

对照品溶液的制备取麦冬皂苷D,山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C对照品适量,加50%甲醇制成每1ml分别含约20μg/ml的混合溶液,即得。

供试品溶液的制备取样品5g,研细,精密称定,精密加入甲醇50ml,加热回流提取1小时,冷却,过滤,滤液蒸干,残渣加水25ml使溶解,加入25ml水饱和正丁醇萃取,正丁醇液蒸干,残渣加2ml甲醇溶解,经0.22μm微孔滤膜滤过,即得。

测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各2μl,注入液质联用仪中,按上述色谱级质谱条件测定,即得。

特征峰归属麦冬中主要的皂苷成分为麦冬皂苷D,湖北麦冬中主要的皂苷成分为山麦冬皂苷B,短葶山麦冬中主要的皂苷成分为短葶山麦冬皂苷C。