【含量测定】
色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;柱温30 ℃;以甲醇为流动相A;0.1%磷酸溶液为流动相B,按下表中规定进行梯度洗脱;检测波长250 nm(五味子醇甲、五味子酯甲、五味子甲素、五味子乙素);280 nm(黄芩苷、黄芩素、汉黄芩素、丹皮酚);321nm(白花前胡甲素、白花前胡乙素)。理论板数按丹皮酚计算应不低于4000。
时间(分钟) | 流动相A(%) | 流动相B(%) |
0~50 | 35→55 | 65→45 |
50~90 | 55→95 | 45→5 |
90~95 | 95→35 | 5→65 |
对照品溶液的制备分别精密称取黄芩苷对照品、黄芩素对照品、汉黄芩素对照品、丹皮酚对照品、五味子醇甲对照品、五味子酯甲对照品、五味子甲素对照品、五味子乙素对照品、白花前胡甲素、白花前胡乙素适量,精密称定,加甲醇制成每1ml含黄芩苷400μg,黄芩素70μg、汉黄芩素40μg、丹皮酚200μg、五味子醇甲20μg、五味子酯甲20μg、五味子甲素20μg、五味子乙素15μg、白花前胡甲素40μg、白花前胡乙素15μg的混合溶液,即得。
供试品溶液的制备取本品10片,精密称定,研细取约1g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇25 mL,称定重量,超声处理30 min,取出,放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
测定法分别精密吸取对照品溶液10µl与供试品溶液20µl,注入液相色谱仪,测定,即得。